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口腔益生菌滤液 ----抑菌清新口腔微生态平衡

发表时间:2023-06-14 14:36作者:口腔益生菌

口腔作为一个特别适合各种微生物生存的环境,健康状态下也有数目和种类都超出人想象的微生物。正常的微生物组成有利于口腔组织内环境稳定。这些定殖在口腔表面的正常有益菌群,在出生后很快便在口腔内定殖,并在整个生命过程中持续存在,与人类长期共存。

细菌的数量占人体所有活细胞的90%,看过一个公式去形容很贴切:我们=10%人+90%的细菌。每个人的身体其实都是各种微生物和真菌的游乐场,它们大都分布在我们的肠道,口腔,生殖系统,觉得已经被你清洗干净的皮肤上。


口腔益生菌滤液中含有混合益生菌菌群,通过

(1)竞争空间位点,争夺营养物质,排斥阻止有害菌的定殖与侵染;

(2)产生具有抑菌小分子物质,抑制有害菌的过度繁殖;

(3)分泌生化信号分子,激活巨噬细胞防御系统,改善口腔微生态环境,抑制有害菌群,改善口腔免疫功能,从而彻底抑制和改善口腔环境。


一、 口腔益生菌滤液—— 口腔微生态

        口腔作为一个特别适合各种微生物生存的环境,健康状态下也有数目和种类都超出人想象的微生物。 由于目前大多数微生物还不能被用常规的方法培养出来,因此口腔中含有的微生物种类还没有一个准确的数字,保守的估计超过500种。而几乎所有的口腔常见疾病都与微生物有密切的关系,如龋病、牙菌斑、牙周病、牙龈炎等

        正常的微生物组成有利于口腔组织内环境稳定。这些定殖在口腔表面的正常有益菌群,在出生后很快便在口腔内定殖,并在整个生命过程中持续存在,与人类长期共存。其一般不会对定殖的组织造成损伤,除非受到不利的环境因素干扰——饮食中糖类的增加或唾液流量的减少,二者均可导致菌斑pH降低。

      所以口腔中的微生物并不一定有害于个体健康,也不会最终导致疾病的发生。实际上,有许多理由相信可人体内的正常菌群有利于健康。

        作为维持口腔健康的一种方法,稳定正常菌群的概念已经被更多的人接受。在口腔健康方面,研究者面临的挑战是在疾病发展过程中如何在口腔内培养有益微生物和防止口腔微生态系统的变化。

                                         

二、口腔益生菌滤液—— 口腔微生物的致病原理

1.龋病的主要致病菌为----变异链球菌

变链球菌的致龋性:

①产酸性和耐酸性

②合成细胞内外多糖

③对牙面的粘附作用④环境刺激应答

     口腔中没有特异性的致龋菌,引起龋病发生的细菌属于口腔的正常菌群,正常情况下口腔细菌与人体之间处于动态的生态平衡。各种因素造成平衡的破坏,正常细菌成为条件致病菌,引发龋病。龋病发生是口腔生态失调的结果。


2.牙菌斑生物膜 ——牙菌斑的生长周期

      在牙面清洁并抛光后20min内形成获得性膜,1-2h内达到稳定。获得性膜形成几分钟至几小时后,开始有细菌附着于其上。最初附着的细菌为球菌,主要为链球菌。之后,细菌聚集,成倍增长,24h后链球菌占菌斑菌丛的95%以上。

     链球菌在菌斑中作为主要的微生物维持7天,之后随着菌斑生态环境的改变,菌斑内细菌开始调整,菌斑进入成熟阶段,厌氧丝状菌逐渐增多,至第14天,显微镜下见厌氧丝状菌为主要微生物。至后期,菌斑由以球菌为主变为由球菌、杆菌、丝状菌、螺旋体菌混合构成。


3.牙周病主要致病菌——卟啉单胞菌属(Porphyromonas):牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis,Pg)牙髓卟啉单胞菌(P.endodontalis,Pe)

作用机理:产生附着和凝集因子,能附着于颊粘膜、牙周袋上皮及菌斑中其他细菌的表面,分泌胞外蛋白酶(如牙龈素(gingipains)、胶原酶、肽酶)、内毒素、酸性和碱性磷酸酶、吲哚、有机酸等代谢产物,导致牙周组织的破坏


三、 口腔益生菌滤液——来源

口腔益生菌的菌种来源: 植物乳杆菌   副干酪乳杆菌   嗜酸乳杆菌

食品在人口腔咀嚼,产生食物碎屑和残渣,糖类和蛋白类物质中大量积累,引起口腔中微生物的发酵,产生口腔异味。

发酵乳杆菌中含有的活性a--半乳糖苷酶,能快速移除底物末端a--连接的非还原性d--半乳糖,或通过转糖基作用将半乳糖基团以a--1,6糖苷键转移到受体C6位的羟基上,从而引起口腔中的a--半乳糖苷糖类物质的分解。

乳酸乳球菌、乳酸链球菌及双歧杆菌中含有的β--半乳糖苷酶,能水解食品中的乳糖,生成低聚半乳糖和葡萄糖,降低口腔PH值,抑制外源菌生长,从而清除口腔异味。乳酸菌类益生菌发酵产生的乳酸菌素、溶菌酶等活性成分对于口腔健康均有良好作用。

     



三、口腔益生菌滤液— 生产工艺

口腔益生菌的菌种来源: 植物乳杆菌   副干酪乳杆菌   嗜酸乳杆菌

     经口腔益生菌(植物乳杆菌,嗜酸乳杆菌等)乳酸菌属发酵培养、分离纯化、灭活及酶解等工艺得到乳酸菌的细胞质片段、细胞壁组分以及细胞内外代谢产物、多糖复合体。


四、 口腔益生菌滤液—— 功效评价

不同菌株对变异链球菌生物膜形成的影响

牙菌斑生物膜是龋齿发生的始动因子,抑制菌斑生物膜的形成可在一定程度上有效抑制龋齿的发生。考察不同菌株对 S. mutans 形成生物膜的影响发现,与对照组不做任何处理的生长 24 h 的 S. mutans 形成的生物膜相比, 副干酪乳杆菌、植物乳杆菌,使得 S. mutans 生物膜中细菌总面积分别减少 68.92%、36.04%和 37.51%,表明上述菌株可以明显抑制 S. mutans 生物膜的形成,其中植物乳杆菌抑制能力最强。


表 1 不同菌株对变异链球菌生物膜形成的影响



不同菌株与变异链球菌的共聚效果考察

乳酸杆菌可通过与 S. mutans 的凝集,即共聚,使致病菌 S. mutans 从口腔中排出,其中交互凝集率是定量衡量共聚能力的一个指标。由图 1 可知,植物乳杆菌、市售产品I和市售产品II均能与 S. mutans 发生共聚集,且植物乳杆菌的共聚集效果最佳。另一方面,考察聚集时间长短对菌株共聚集能力的影响发现,随着时间的延长,上述菌群对 S. mutans 的共聚集能力均不断增加,其中 WZ-99 共聚集能力增加最为显著

图 1 :三株菌与 S. mutans 的共聚集能力



四、口腔益生菌滤液— 功效评价

植物乳杆菌对PBMCs 免疫调节的影响

进一步的,针对抑菌和共聚集效果较佳的植物乳杆菌WZ-99 进行了对免疫调节影响实验,结果如下。

以人体外周血中的单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCs)为研究对象,考察植物乳杆菌 和变异链球菌作用于PBMCs 的影响,通过培养上清液中的抑炎细胞因子白介素-10(IL-10) 和促炎细胞因子白介素-12p70(IL-12p70)的释放量的变化来评价菌株对 PBMCs 免疫调节的影响。从图 2 和表 2 中可以看出,当用植物乳杆菌刺激 PBMCs 时,其培养上清液中的抑炎细胞因子 IL-10 和促炎细胞因子 IL-12p70 水平都有提高,且 IL-10/IL-12p70 比值增大,说明植物乳杆菌对PBMCs 细胞有一定的免疫调节能力。相反,在变异链球菌刺激下,PBMCs 产生了炎症(图 2-A)。

        而通过将植物乳杆菌WZ-99与有炎症的 PBMCs   共混合后,上清液中抑炎因子 IL-10   和促炎因子 IL-12p70   水平均不同程度下降(图 2-B),且 IL-10/IL-12p70 的比例增大(表 2),表明植物乳杆菌 在体外降低炎症水平方面具有一定的作用,可通过调节宿主免疫系统来促进机体的健康。



图 2   菌株对人外周血单核细胞细胞因子浓度的影响

图 2-A:植物乳杆菌或变异链球菌对PBMCs 细胞因子的影响

图2-B: 植物乳杆菌对变异链球菌刺激后 PBMCs 细胞因子的影响



表2:植物乳杆菌或变异链球菌对人外周血单核细胞细胞因子比例的影响


以上对变异链球菌生物膜形成的影响、共聚效果和免疫影响三个方面考察了相关菌株的功能, 结果显示唾液乳杆菌、乳酸杆菌抑制口腔变异链球菌感染方面具有明显作用力。


口腔益生菌发酵酶:植物乳杆菌、乳酸乳球菌、两歧双歧杆菌发酵,提取分解酶混合物(半乳糖苷酶等),主要用于分解龋齿形成过程中关键的食物残渣和糖类物质;

抑菌肽:益生菌发酵产抗菌肽和部分溶菌酶,小分子蛋白或肽类物质,抑制部分口腔有害菌的繁殖,维护口腔微生态平衡。


五、口腔益生菌滤液— 口气清新

我国平均 4 个人里,就有 1 个人有口臭。

可怕的是,有口臭的人,大多数是「有口臭而不自知」。

这是因为我们的「出气口」和「进气口」通道不大一样,用嘴呼出的口气很难直接大量吸入自己的鼻子。

这也是为什么,别人能闻到口臭,自己却闻不到的原因。等有好心人提醒,可能早已不知不觉熏倒一大片了……


80%~90% 的口臭都是口源性的,也就是单纯因为口腔卫生做不到位而导致的。


早晚刷牙是可以清洁口腔卫生,但只要你吃过东西,口腔里留有食物残渣,细菌就会不知疲倦地分解。


这一过程中产生的挥发性硫化物 VSC(没错,就是屁里的那个物质),也就是口臭气体的主要构成物质,就会「卷土重来」。



五、口腔益生菌滤液— 口气清新

  10%的口腔益生菌滤液对口气 VSC浓度值的抑制测试

测试单位:北京中科光析化工技术研究所(气体实验室)   报告编号:ZX210726-100501



  10%的口腔益生菌滤液对口气 VSC浓度值的抑制测试

测试单位:北京中科光析化工技术研究所(气体实验室)   报告编号:ZX210726-100501



六、口腔益生菌滤液——DATA



七、口腔益生菌滤液— 参考配方













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