益生菌安全性评价的关键要素是什么？

益生菌安全性评价的关键要素是什么？

理论上，益生菌对敏感个体可能存在四种副作用，即系统感染、产生生物胺等有害物质、过量免疫刺激和基因转移等。

调查研究认为，来自人体的乳杆菌和双歧杆菌是安全的。事实上，绝大多数乳杆菌和双歧杆菌已有长期食用历史，为普遍认为的安全菌株（GRAS，Generally Recognized As Safe），也是人体肠道的正常菌群成员。尽管如此，新型益生菌的安全性评估仍然非常重要。

安全性评价的关键要素主要体现在以下几个方面：

(1) 菌株的来源和鉴定：许多研究人员认为，益生菌来源与其特殊的商业化应用关系非常密切；但FAO/WHO专家建议，益生菌特定的生理作用较其来源更重要。因为婴儿出生时肠道实际上是无菌的，人体肠道菌群的来源具有很大的不确定性。

a) 建议采用最常用而且有效的方法鉴定细菌属、种、株，并结合使用表型实验和基因分型实验方法。细菌的命名必须与通行的、科学性的名称一致。

b) DNA - DNA杂交是确定菌株种属的参考方法，但是该方法需要保藏大量参考菌株，许多实验室条件不允许，建议用16S rRNA基因的方法替代杂交实验，并建议证实时联合运用基因分型试验与表型试验。用作鉴别的表型实验包括糖发酵的生化反应和葡萄糖发酵终产物。菌株分型必须用可重复的基因分型方法或特殊的表型实验。脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验是标准方法，也可使用随机扩增多态DNA(RAPD)方法，但该方法重复性较差。染色体外遗传性物质(如质粒)检测，也可用于菌株的分型及特征鉴定。

(2) 耐药性能（可转移的耐药基因）：近年来，耐药细菌已成为威胁公众健康的严重问题，因此，筛选潜在益生菌的耐药性能非常重要。益生菌耐药性的测试方法主要有两种，一是对广谱抗生素的耐药性，二是耐药基因或毒力质粒的不可转移性能评估。

a) 理想情况是，益生菌应该具有对临床使用抗生素的耐药性，但是这种耐药性不能转移至其它致病菌中。耐药性能主要有两种形式，一是与生俱来的耐药性能，即特定种属细菌对特定抗生素的耐药性；二是获得性耐药性能，即细菌通常对特定抗生素是敏感的变为耐药的，这种耐药性是由于内源性突变或外源耐药基因转移获得的。

b) 益生菌的耐药性测试通常采用经典的平板扩散法，但是，绝大多数抗生素对乳酸菌的抑制作用仍然无法达到评价的一致性。另外，区分益生菌与生俱来的耐药性、非特异性耐药性和获得性耐药性能非常困难。

c) 另外，评估菌株可能的副作用、安全食用历史、益生菌目标人群、以及生产过程的安全控制等都是益生菌安全性评价的关键要素之一。